Resolución de subunidades de trombina como o encima Agapurin do veleno de Agkistrodon halys e secuenciación de residuos de aminoácidos

[Resumo] Obxectivo Determinar os 15 residuos de aminoácidos N-terminais de dúas subunidades similares de agacutina.As dúas subunidades da molécula enzimática deben dividirse para obter a subunidade de cadea peptídica única e secuenciarse.Métodos Obtívose agacutina altamente purificada por método bioquímico.Preparáronse mostras de subunidade única para identificación e secuenciación mediante a separación por electroforese SDS-PAGE, a recuperación de tiras adhesivas de subunidades e a tecnoloxía de electrotransferencia de membrana PVDF.Este último determinou 15 residuos de aminoácidos no N-terminal da subunidade polo método de degradación de Edman.Resultados A secuencia da subunidade grande (16 kDa) foi DCSSGWSSYEEHQYY, e a da subunidade pequena (15 kDa) foi DSSGWSSYEEGHEYYV.Conclusión Os resultados da secuenciación mostraron que a Agacutin era unha nova encima como a trombina do veleno de serpe mediante a busca na base de datos NCBI.